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贵州蛋白纯化厂家供应

发布时间:2023-05-14 01:49:05
贵州蛋白纯化厂家供应

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Plasmid Seplife LX,丝氨酸蛋白酶纯化亲和层析介质:苯甲脒类物质是丝氨酸蛋白酶的广谱抑制剂,将这类物质偶联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上,可以从各种来源的样品中进一步胰蛋白酶,凝血酶,尿激酶,激肽释放酶,前激肽释放酶等丝氨酸蛋白酶。

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洗脱峰杂质多,可能原因:非特异性结合,清洗不彻底,降解等。解决方法:蛋白纯化过程加蛋白抑制剂防止降解,上样完后要彻底清洗,加一定的NaCl和咪唑减少非特异性结合。使用几次后,介质结合效率降低,柱效降低。可能原因:介质上沉积大量杂质等。解决方法:彻底清洗,IDA/IMAC脱镍再生处理。

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疏水作用层析(Hydrophobic Interaction Chromatography,HIC)是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。由于蛋白质空间结构受到不同缓冲液环境的影响,而发生立体结构发生改变。疏水层析填料利用这种结构的改变,在含盐的水溶液体系中,借助于层析填料与蛋白质分子之间的疏水作用达到吸附活性蛋白分子的目的,这种层析技术称为疏水作用层析。

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样品的认知:在层析过程要对样品做足够的认知,包括样品的浓度,样品的组成等做一定的了解,如真核细胞分泌表达的样品,要了解其上游工艺,培养基组成,培养过程等的一些添加剂是否对层析填料的性能及寿命衰减会有影响,及样品的酸碱度,离子强度,浊度等做足够的了解,必要的时候要进行再次澄清处理及体系置换。