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rProtein A Seplife Suno亲和层纯化后HCP含量偏高,如何优化

2022-05-19 09:45:49

a.HCP(宿主细胞蛋白)和介质之间非特异性结合引起,上样后,淋洗方面优化:1.pH(7.0-4.5梯度)+150mM NaCl淋洗3-5CV;2.平衡液+0.1-1 M精氨酸淋洗3-5CV;3.平衡液加0.1-1M GdnHCl (盐酸胍)淋洗3-5CV;4.平衡液加0.5-3M Urea(尿素)淋洗3-5CV;5.平衡液加0.5-1% Tween-80淋洗3-5CV;6.平衡液加0.1-1% Triton X-100淋洗3-5CV;7.弱洗脱,将洗脱液的pH适当提高,加0.5M精氨酸洗脱

b.HCP和目标分子间的非特异性作用力引起的纯化后HCP含量高,a,上样后,用Ph8-10的缓冲液淋洗3-5CV,b,将平衡液及上样液的pH提高到8-10.


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