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rProtein A Seplife Suno

基本信息

rProtein A Seplife Suno是蓝晓科技应对抗体客户需求推出的Protein A亲和层析填料,以球形,高交联琼脂糖凝胶为基质,通过自主创新技术将耐碱性重组蛋白A键合到该基质上。可以特异性地与抗体的Fc区结合,用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,只需一步亲和层析,即可从腹水、血清或培养液等样品中得到高纯度的抗体。
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rProtein A Seplife Suno是蓝晓科技应对抗体客户需求推出的Protein A亲和层析填料,以球形,高交联琼脂糖凝胶为基质,通过自主创新技术将耐碱性重组蛋白A键合到该基质上。可以特异性地与抗体的Fc区结合,用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,只需一步亲和层析,即可从腹水、血清或培养液等样品中得到高纯度的抗体。

产品技术参数

产品名称

rProtein A Seplife Suno

外观

球状凝胶,无臭无味

基质

高交联琼脂糖微球

配基

耐碱重组Protein A

流速(cm/h)

>250cm/h(0.1MPa)

耐压(MPa)

0.3MPa

粒径(μm)

65μm

载量

70mg/ml

配基密度

8~9mg/ml

耐碱性

0.1-0.5M NaOH

载量和驻留时间关系

压力流速曲线

备注:层析柱规格:16mm×400mm

耐碱测试

层析柱测试完DBC(10%流穿)后,用0.5M NaOH洗脱15min,室温下放置24h,然后测试DBC变化。

填料名称

泡碱前DBC(mg/ml)

泡碱后DBC(mg/ml)

下降百分比%

国外品牌

60.3

46.7

22.6

rProtein A Seplife Suni

71.5

56.4

21.0

抗体纯化应用

某抗体发酵液纯化过程,从载量,纯度,收率,洗脱体积等方面平行对比国外品牌LX,结果表明各方面数据与参比填料接近。

实验条件:

仪器

AKTA Pure 150

层析柱

r-ProteinA Seplife Suni(Hitrap 1ml预装柱)

预平衡

20mM PB+150mM NaCl,pH7.4

淋洗

20mM PB+150mM NaCl,pH7.4

洗脱

100mM柠檬酸钠,pH3.0

CIP

0.5M NaOH

实验结果:

填料名称

载量(mg/ml)

SEC纯度(%)

收率(%)

国外品牌LX

53.5

97.2

99.4

rProtein A Seplife Suni

54.6

96.9

99.2


使用方法

3.1 装柱

装柱按照标准操作规程操作,必须保证每种材料都处于工作温度。r-ProteinA Seplife Suno填料可使用常规琼脂糖层析介质装柱方法。

3.2平衡

用3-5CV预平衡液平衡层析柱,直至pH和电导率保持不变。

3.3上样

样品的预处理:样品离心后,用0.45μm滤膜过滤,然后上样,以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,一般可通过测试该样品在层析柱上的DBC作为参考。

3.4洗脱

 一般利用低pH缓冲液进行洗脱,选择pH3.0-3.5的缓冲液:如0.1mol/L甘氨酸-HCl,pH3.0,实际洗脱条件可优化。洗脱后,应立刻中和缓冲液,将收集到的抗体溶液中和至中性(pH7.4左右),以维持抗体的生物活性,一般中和液为1mol/L Tris-HCl,pH9-10。 

3.5清洗

CIP方法:

r-ProteinA Seplife Suno是一种耐碱亲和介质,可以耐受 0.1M-0.5M NaOH溶液的清洗,一般使用大于3CV的 0.1-0.5 M NaOH,接触时间为15 min;然后用5CV的平衡液冲洗至中性。

注:由于发酵液纯化过程会引入部分杂质吸附在层析柱上,造成压力升高,在做CIP时,可考虑一定次数后进行up flow。

3.6存储

密封保存在4~8℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。

3.7运输

运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

4.注意事项

(1)该介质从冷室或冰箱中取出后最好在室温下恢复到室温,然后缓慢摇匀后装柱,以免产生气泡影响柱效;

(2)一般Protein A亲和层析填料装柱高度15-25cm,根据实际情况做合理的高度选择;

(3)发酵液上样前做好澄清过滤操作,以防堵塞层析柱;

(4)凝胶用低pH缓冲液洗脱的时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快洗到pH中性,以延长介质的使用寿命。


产品牌号

货号

包装规格

rProtein A Seplife Suno

A40931015ml

A4093102

25ml

A4093103

100ml

A4093104

500ml

A4093105

1L

A4093106

5L

A4093107

10L

生产日期:见标签

使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年

注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园

售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

邮政编码:710076

联系电话:86-29-8110 4050

传真:029-8669 1600-8254

官方网站:www.sunresin.com

注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司

注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室

联系电话:0512-65160522


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