Seplife® RP LXMS-15(300)是蓝晓科技自主研发的一款中高压色谱填料,是以聚苯乙烯/二乙烯基苯为基质的多孔高聚物,其具有比表面积大、优良的化学、物理稳定性等特点。与传统反相硅胶填料不耐酸碱,pH操作范围窄相比,Seplife® RP LXMS-15(300)拥有高流速、高动态载量的优点, 非常适合快速高效层析的应用,在提高用户生产效率的同时,进一步降低了用户的生产成本。广泛应用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子进行反相色谱(reversed phase chromatography RPC)分离。
产品牌号 | Seplife® RP LXMS-15(300) |
外观 | 白色球状颗粒 |
化学结构 | |
基质 | 聚苯乙烯-二乙烯基苯 |
粒径(μm) | 15±2 |
平均孔径(Å) | 300 |
湿视密度 (g/ml) | 0.80-0.90 |
含水量 (%) | 50-80 |
推荐工作流速(cm/h) | 100-1000 |
pH稳定性 | 2~12(长期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化学稳定性 | 对常用的水性缓冲液稳定,1M HCl, 1M HCl/90%甲醇,90% HAc,6M GuHCl, 100%正丙醇,100%乙醇,100%甲醇,100%丙酮,0.45MNaOH/40% 2-丙醇,1.0 M NaOH3,0.1% TFA在水中,0.1% TFA在乙腈中,100%异丙醇,100%四氢呋喃 |
动态载量(mg/ml) | 32-40 mg(VB12); 30~60 mg (IN) |
耐压(Mpa) | 5 |
存储 | 20%乙醇溶液,4℃至30℃ |
使用方法
3.1 装柱
匀浆浓度等于静置胶体积除以除以匀浆后的总体积。采用0.5M NaCl匀浆可获得最佳装柱效果,其浓度为60%-70%。方法如下:
1)色谱柱的柱体积 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。
Ac:色谱柱横截面积;L:色谱柱高度;r:色谱柱半径。
2) 搅动介质形成匀浆液,量取所需质量或体积。其为柱体积的1.2倍左右,防止收缩。
3)用 0.5 M NaCl 溶液置换20%乙醇,平衡过夜。
4)装柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液调整匀浆浓度为 65 ~ 70%;将匀浆一次性倒入层析柱,沉降平衡后标注高度。
5)将分配器装入,调节高度使得压缩系数为 1.05 ~ 1.10;然后启动输液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床稳定。
6)按照 SOP 进行柱效和对称性的测定,须达到预定标准。
3.2 柱效评价
装好之后,色谱柱用3-5CV超纯水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并进行柱效测试。
离子交换层析柱的柱效测试方法
样品: 2 M NaCl 溶液
上样量: 1~5 % 柱体积
洗脱液: 0.5 M NaCl 溶液
线性流速: 100 cm/h
检测: UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上样:电导检测仪
3.3 清洗
装好的色谱柱应使用至少使用5CV的去离子水清洗。
3.4平衡
装柱后先用流动相平衡3-4CV,流速控制1-5cm/min,直到流穿的电导和pH保持不变方可进行上样。
3.5上样
固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液尽量提前浓缩;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。同时为了避免堵塞层析柱,样品需要(离心或膜过滤)澄清处理。上样量根据介质的载量和样品中目标蛋白的浓度估算,上样前请确保目标物缓冲液应尽可能与平衡液一致。首次试验可减小上样量,之后可根据目标物保留时间和峰型增加上样量。
3.6 洗脱
采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的(含水)溶液溶出,用酸、碱、缓冲液等调节PH值或两者并用使有效成分洗脱。
3.7再生清洗(CIP)
先使用乙醇、丙酮、碱+乙醇等溶剂按操作流速冲洗3-4CV,然后用流动相平衡清洗3-4CV。
4.存储
暂时不使用的层析介质需保存在 4~30 ℃ 的 20-25%乙醇中。
5.运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
产品牌号 | 货号 | 包装规格 |
Seplife® RP LXMS-15(300) | PS00042X(15)2-1 | 25ml |
PS00042X(15)2-2 | 100ml | |
PS00042X(15)2-3 | 500ml | |
PS00042X(15)2-4 | 1L | |
PS00042X(15)2-5 | 5L | |
PS00042X(15)2-6 | 10L |
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码:710076
联系电话:86-29-8110 4050
传真:029-8669 1600-8254
官方网站:www.sunresin.com
注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司
注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室
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