Seplife® LXPM SP 5504S层析介质是以聚丙烯酸酯为基质，在表面进行了亲水性改性再键合了强酸性离子交换基团，具有分辨率高、载量高、化学稳定性好、机械强度大、非特异性吸附小等特点，具有卓越的生物相容性和柱床稳定性，特别适合大规模制备的应用，显著提高了下游纯化工艺的生产效率，可以降低成本，创造出较好的经济效益，广泛应用于抗体、蛋白质、多肽、核酸（寡核苷酸）、病毒，胰岛素等生物分子的捕获、中度纯化、精细纯化。
骨架 | 聚甲基丙烯酸甲酯 |
外观 | 白色不透明球状颗粒 |
功能基团 | -O-R-O-(CH2)3-SO3- |
交换容量（mmol/mL） | 0.09-0.13 |
D50v粒度（μm） | 50 |
孔径（Å） | 1000 |
动态载量（mg/ml,Lysozyme） | ≧115 |
pH范围 | 2-13 |
最大耐压（MPa） | 0.8 |
| 工作温度（℃） | 4-30 |
存储 防腐剂 | 20%乙醇溶液，150mol/l NaCl |
再生 | 0.5-2M NaCl溶液 |
清洗 | 0.1-0.5M NaOH溶液（或者50%乙醇） |
| 稳定性 | 所有常用缓冲液，1M醋酸，1M NaOH，1M盐酸，100%乙醇、IPA等常用有机溶剂；避免接触强氧化剂 |
使用方法
3.1 装柱
匀浆浓度等于静置胶体积除以除以匀浆后的总体积。采用0.5M NaCl匀浆可获得最佳装柱效果，其浓度为60%-70%。方法如下：
1)色谱柱的柱体积 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。
Ac：色谱柱横截面积；L:色谱柱高度；r：色谱柱半径。
2) 搅动介质形成匀浆液，量取所需质量或体积。其为柱体积的1.2倍左右，防止收缩。
3）用 0.5 M NaCl 溶液置换20%乙醇，平衡过夜。
4）装柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液调整匀浆浓度为 65 ~ 70%；将匀浆一次性倒入层析柱，沉降平衡后标注高度。
5）将分配器装入，调节高度使得压缩系数为 1.05 ~ 1.10；然后启动输液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床稳定。
6）按照 SOP 进行柱效和对称性的测定，须达到预定标准。
3.2 柱效评价
装好之后，色谱柱用3-5体积超纯水清洗。100cm/h流速平衡并进行柱效测试。
离子交换层析柱的柱效测试方法
样品： 2 M NaCl 溶液
上样量： 1~5 % 柱体积
洗脱液： 0.5 M NaCl 溶液
线性流速： 100 cm/h
检测： UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上样：电导检测仪
3.3 清洗
装好的色谱柱应使用至少使用5BV的去离子水清洗。
3.4 平衡
使用适当的5-10倍柱体积缓冲液进行柱子的平衡，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致），缓冲液 如 Buffer A，如 20 mM PBS, pH7.0，具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点、离子交换介质的种类进行筛选和优化。
3.5上样
固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用 平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或膜过滤处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算，上样前确保样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。
3.6洗脱
上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线稳定，可以根据实际情况采取提高盐浓度或改变流动相 pH 的方法依次洗脱吸附于层析介质上的样品。
3.7再生
每次层析之后可用0.5-2 M NaCl 清洗层析柱，除去强结合于层析介质上的蛋白。
3.8 在位清洗
为了保持层析柱的性能，若有蛋白质或其他杂质在再生过程中未能有效去除，可执行在 位清洗步骤，在位清洗时，也可采用反向冲洗的方法，具体操作步骤如下：
（1）对于通过离子键结合过强的蛋白，可用3BV以上的2M NaCl 清洗，并用3BV以上的去离子水清洗；
（2）对沉淀蛋白、以疏水性结合的蛋白或脂蛋白，可用0.2~0.5 M NaOH 清洗（与层析介质接触时间 1~2 h），并用5BV以上平衡液和3BV以上的去离子水清洗；
（3）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用5BV以上的50%乙醇或 30%异丙醇 清洗（与层析介质接触时间0.5-1 h），并用 5 BV 以上的去离子水清洗。也可用含非离子表面活性剂的碱性或酸性溶液清洗，如0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M乙酸清洗 1-2 h，并用5BV以上的50%乙醇冲洗去除去污剂，然后用5BV以上的纯水冲洗（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。
3.9 应用案例
（1）填料：5ml预装柱，Seplife® LXPM SP5504S
（2）样品：某猪圆环发酵液，上样量：5ml
（3）平衡缓冲液A：20mmol/L PB，PH7.0
（4）洗脱缓冲液：20mmol/L PB+1mol/L Nacl，PH7.0
（5）洗柱溶液：0.5M NaOH
图1.Seplife® LXPM SP5504S纯化蛋白色谱图
备注：蓝色曲线：Seplife® LXPM SP5504S
紫色曲线：某外样
4.存储
暂时不使用的层析介质需保存在 4～30℃ 的 20%乙醇中，已经装好的层析柱应保存在含 20%乙醇的缓冲液(pH 7.0)；使用前请装柱后将乙醇清洗干净。
5.运输
运输中避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
产品牌号 | 货号 | 包装规格 |
Seplife® LXPM SP5504S | PM50124S1-1 | 25ml |
PM50124S1-2 | 100ml | |
PM50124S1-3 | 500ml | |
PM50124S1-4 | 1L | |
PM50124S1-5 | 5L | |
PM50124S1-6 | 10L |
生产日期：见标签
使用期限：在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业：西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址：西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位：西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码：710076
联系电话：86-29-8110 4050
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官方网站：www.sunresin.com
注册人名称/销售企业：苏州蓝晓生物科技有限公司
注册人地址/销售地址：苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室
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