Seplife® Oligo dT是蓝晓科技自主研发的一种新型高刚性聚合物亲和填料,主要用于捕获mRNA» Seplife®Oligo dT以聚苯乙烯为基 质,具有均一的超大孔径,表面进行了特定的长链间隔臂修饰并键合了自主开发dT配基,具有较高的载量和特异性结合力,非特异性吸附 低,可耐受高温(65t )。
技术指标
产品名称 | Seplife® Oligo dT |
外观 | 白色球状,无臭无味 |
种类 | 亲和填料 |
基质 | 聚苯乙烯 |
配基 | dT20 |
粒径(u m) | 〜50 |
配基密度(umol dT/mL ) | 0.27 |
工作温度 | 2~65t |
压缩因子 | 1.06 |
压力流速(cm/h) | 1000 (0.15MPa条件),根据实际使用情况调节流速,避免超过压力上限 |
最大耐压强度(MPa) | 10 |
pH稳定性 | 2~13 (长期) |
离子强度 | 0 to 5 M,常用的盐溶液 |
CIP | 0.1M NaOH |
缓冲体系 | mRNA纯化常用的缓冲溶液;0.5 M NaOH, 2 MMgCI2, 20 mM EDTA;避免暴露于以下条件:如强氧化剂 (如次氯酸盐)、氧化性酸(如硝酸)、强还原剂(如亚硫酸盐)、丙酮、四氢咲喃或苯甲醇 |
常用溶剂 | 水、0~ 100%乙醇、乙睛、2M乙酸、1 M盐酸等常用有机溶剂;避免暴露于以下条件:如强氧化剂(如次氯酸 盐)、氧化性酸(如硝酸)、强还原剂(如亚硫酸盐)、丙酮、四氢咲喃或苯甲醇 |
储存条件 | 20%乙醇溶液,2-813 |
使用方法
3.1 装柱
根据填料压缩因子,匀浆比例50-70%,层析柱内径和实际需求,量取填料,一般填料需要沉降静置4h读取体积。用0.1mol/L NaCl或者平衡缓冲液进行装柱。必须保证每种材料都处于工作温度,所用缓冲液,填料使用前均需要脱气,填料需要一次倒入装柱器或者柱管内,避免多次加料。
Seplife® Oligo dT具有良好的刚性,可以填充在低压玻璃柱和高压不锈钢柱中。填料的压缩因子范围建议为1.06-1.5。
对于直径较小的柱子(≤1cm),我们建议装柱流速1000 - 2000cm/h;或者使用实际操作系统最大操作流速至少50%的流速装柱。一般压柱至少3CV。
层析柱装填好,用装填溶液淋洗柱床2-3CV,流速为实际使用流速,以使柱床稳定。
为了避免损坏柱床,运行时的压力,不能超过装柱压力的80%。
3.2柱效测定
常用测试柱效的方法:
参数 | 条件 |
流速 | 实际操作流速(100-300cm/h) |
流动相 | 0.1M NaCl |
样品 | 1M NaCl |
上样量 | 2%柱体积 |
备注:一般上样前用流动相至少平衡4CV。
3.3平衡
使用3–4 CV平衡缓冲液平衡柱子,常用缓冲液为10 mM Tris-HCl,0.5 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4.
3.4 样品准备
mRNA样品用平衡缓冲液混匀,常用缓冲液为10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4。
如需变性,可将样品置于65℃的水浴中加热10-15min,然后立即将样品置于冰上。
3.3上样
以50-150 cm/h的流速上样。
3.4淋洗
首先,用平衡缓冲液10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4淋洗2-3 CV。
然后,用10 mM Tris-HCl,100-300 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4,淋洗3-5 CV,直至电导走平。
3.5洗脱
一般洗脱结合的mRNA用3-5 CV,10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA, pH 7.4 ;或者使用超纯水3-5 CV,进行洗脱。
备注:提高温度至65℃,可以有效提高洗脱速率。
3.6再生
再生缓冲液需要根据样品的纯度、组成确定。
常用超纯水3-5 CV。
对于结合较强的杂质需要使用含0.5M NaOH的20-30%乙醇溶液清洗3-5 CV。
3.7在位清洗
先用3-5CV 0.1M NaOH冲洗,再用平衡缓冲溶液清洗3-5CV,直至电导不变。
3.8存储
密封保存在2~8℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱子保存在2~8℃,20%乙醇溶液中。
3.9运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
订购信息
产品牌号 | 货号 | 包装规格 |
Seplife® Oligo dT | PS11225X(50)1-1 | 25ml |
PS11225X(50)1-2 | 100ml | |
PS11225X(50)1-3 | 500ml | |
PS11225X(50)1-4 | 1L | |
PS11225X(50)1-5 | 5L | |
PS11225X(50)1-6 | 10L |
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码:710076
联系电话:86-29-8110 4050
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官方网站:www.sunresin.com
注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司
注册人地址/销售地址:苏州市区工业
苏州市工业园区裕新路108号
0512-65160522
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