Seplife G75 M葡聚糖层析介质是一种具有三维网状结构的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交联剂环氧氯丙烷通过醚键互相交联聚合而成,交联度越大,网孔结构就越紧密,吸水后的体积膨胀就越小,能允许进入层析介质内部的分子的分子量也就越小,反之亦然。层析时,大于层析介质孔径的大分子,被阻于凝胶相外,沿着层析介质颗粒之间的间隙走,下移速度最快,故最先洗脱下来,中等大小的分子进入部分层析介质孔中,洗脱速度次之,而小分子因为能够进入全部层析介质孔中,受到阻力最大,故最后被洗脱下来,由此,物质得到分离和纯化。Seplife G75 M葡聚糖层析介质适用于脱盐、多肽分离、清洗生物提取液、分子量测定。
产品牌号 | Seplife G75 M |
外观 | 白色球状,无臭无味 |
粒径(干,μm) | 40~120 |
溶胀度 | 12~15 |
分离范围 | 3000~8×104 |
耐压 | 遵从Darcy 定律 |
流速 | 遵从Darcy 定律 |
pH稳定性 | 2~10 |
应用 | 适用于脱盐、多肽分离、清洗生物提取液、分子量测定 |
使用方法
3.1预处理
葡聚糖凝胶过滤层析介质一般是干粉状态,使用前必须在过剩的缓冲溶液(蒸馏水)中进行溶胀(室温溶胀过夜,或者在沸水中溶胀1h,避免使用磁力搅拌、药匙或者玻璃棒搅拌造成填料损坏)。溶胀后,使用缓冲液进行调节,形成浓稠的浆液,75%(体积百分比)左右,再进行脱气。
注:在溶胀前加入缓冲溶液(蒸馏水)使其自然沉降,自然沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒多,需要重复多次漂洗将其除去,防止层析时阻塞凝胶柱,影响流速。
3.2 装柱
装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.3平衡
使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子,务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。
3.4上样
(1)介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
(2)凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50 cm 以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可。
(3)样品中如有杂质或沉淀应该在上样前过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
3.5洗脱
可以采用无盐水,也可以采用用平衡缓冲液做洗脱剂进行洗脱。在平衡缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或者盐梯度洗脱都可以完全分离。
3.6在位清洗
凝胶使用10次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗4个柱床体积,再以至少3个柱床体积平衡缓冲液再生。
3.7存储
干粉保存在4~30℃,干燥、通风、清洁处;溶胀后的介质保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,避免与氧化剂接触,不可冷冻。
3.8运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4.注意事项
(1)样品必须澄清没有颗粒。
(2)样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。
(3)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
(4)洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。
(5)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。
(6)本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中。
产品牌号 | 货号 | 包装规格 |
Seplife G75 M | D1007410M | 25g |
D1007411M | 100g | |
D1007412M | 500g | |
D1007413M | 1kg | |
D1007414M | 5kg | |
D1007415M | 10kg |
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
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注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司
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