云浮Blue Seplife FF

Blue Seplife FF层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型亲和层析介质，它是将蓝色染料汽巴兰（Cibacron Blue 3G-A）偶联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上。Blue Seplife FF与目标蛋白的结合主要是配基提供的电子对与疏水作用的综合结果。该介质具有良好的化学稳定性，基团脱落少，使用寿命长，使用方便，应用非常广泛，可用于白蛋白、干扰素、凝血因子以及各种需要NAD+和NADP+酶的分离纯化。

使用方法

3.1装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度，凝胶装柱前需要脱气。

3.2平衡

用2～5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡，直至pH和电导率保持不变。平衡缓冲液一般是根据需要纯化的蛋白来决定用哪种缓冲液。 

3.3上样

（1）不同物质和介质会有强弱不同的结合能力，主要取决于流速、pH、缓冲溶液组成和温度。

（2）样品pH 应该和平衡缓冲液pH相同，上样前样品应该用0.22um或者0.45um的滤膜过滤，可以延长凝胶的使用寿命。

（3）上样完后用缓冲液平衡，直至流出液电导和pH不变。

3.4洗脱

（1）洗脱液根据需要纯化的样品决定。可以采用改变缓冲液pH、极性或者离子强度。

（2）特异性吸附蛋白可以采用低浓度竞争洗脱、梯度或者线性洗脱。

3.5 再生

 对于使用过的凝胶，先用2~3倍柱床体积的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl（pH8.5）和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl（pH4.5）依次反复冲洗3~4次，然后用平衡缓冲溶液平衡。在一些应用中，变性蛋白或者一些脂类物质在再生步骤不会被洗脱掉，可以采用在位清洗（CIP）去除。

3.6在位清洗

层析纯化过程中产生的沉淀或变性蛋白可用如下方法进行在位清洗：

（1）先用4倍柱床体积0.1M NaOH，流速40cm/h清洗；

（2）然后用3~4倍柱床体积2M硫氰酸钾溶液清洗柱子；

（3）最后立即用至少5倍柱床体积的缓冲液平衡柱子（pH8.0）。

3.7存储

保存在2~8℃，20%乙醇溶液中（pH8.0，含0.1M磷酸二氢钾），干燥、通风、清洁处。避免与氧化剂接触，不可冷冻。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。

注意事项

（1）样品必须澄清没有颗粒。

（2）样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后，才能进行柱层析。 

（3）所装的柱床必须表面平整，无沟流及气泡，否则应重装。

（4）洗脱过程中应严格控制流速，且勿过快。

（5）加样及整个洗脱过程中，严防柱面变干。

（6）本品应避免与氧化剂接触，避免长时间暴露在空气中。

生产日期：见标签

使用期限：在适当的贮藏条件下可贮藏5年

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