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Butyl Seplife 4B

基本信息

Butyl Seplife 4B层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,它是将丁基键合在4%琼脂糖凝胶上,利用疏水相互作用实现目标产物的纯化分离,是乙肝疫苗的专用疏水介质。
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Butyl Seplife 4B层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,它是将丁基键合在4%琼脂糖凝胶上,利用疏水相互作用实现目标产物的纯化分离,是乙肝疫苗的专用疏水介质。


产品牌号

Butyl Seplife 4B

外观

白色球状凝胶

基质

4%琼脂糖凝胶

配基

丁基

形状

球形

耐压流速(cm/h)*

70~140cm/h(在0.15Mpa)

粒径(μm)

45~165

蛋白吸附量

>26mg(BSA)/ml

工作温度

4~40℃

pH稳定性

3~13(长期),2~14(短期在位清洗[CIP])

化学稳定性

在以下液体中稳定:所有常用的水相缓冲液, 1mol/L 氢氧化钠;70%乙醇;50%乙二醇;8M尿素;6mol/L盐酸胍;1mM HCl

耐热性

121℃,0.1M NaCl溶液30min

应用

乙肝疫苗专用疏水介质

*检测条件:层析柱16mm×300mm;*柱床高15cm;温度25℃;流动相为0.1mol/L NaCl。

使用方法

3.1 装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。

3.2平衡

使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。

3.3上样

(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤以后上样。

(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目标产物。

(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。

3.4洗脱

采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱,最常用的是低盐浓度缓冲液,如0.02~0.05 mol/L的PBS。

3.5 再生

一般先用低盐浓度的缓冲溶液洗10倍以上的柱床体积,然后用结合蛋白的平衡液洗到平衡即可。若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗除去。

3.6在位清洗

(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床体积的2M NaCl去除。

(2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可以先用1倍柱床体积的0.1M NaOH冲洗,再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。

(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

3.7存储

Butyl Seplife 4B密封保存在4~30℃(保存溶液为20%乙醇+0.1M醋酸钠溶液)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

注意事项

(1)采用1/5层析柱的总结合载量,可在梯度洗脱时得到优化的分离。

(2)样品与Butyl Seplife 4B必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。 

(3)在疏水层析中,疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大,以下因素的影响也不可忽视:样品溶解度、纯化规模等。

(4)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。

(5)若是大规模纯化和捕获蛋白,采用非连续(间隔式)浓度变化洗脱,可以减少分离时间和缓冲液用量。

(6)洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。

(7)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。


产品牌号

货号

包装规格

Butyl Seplife 4B

A3051102

25ml

A3051103

100ml

A3051104

500ml

A3051105

1L

A3051106

5L

A3051107

10L

生产日期:见标签

使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年

注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园

售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

邮政编码:710076

联系电话:86-29-8110 4050

传真:029-8669 1600-8254

官方网站:www.sunresin.com

注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司

注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室

联系电话:0512-65160522



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